INT J LAB HEMATOL:qPCR定量p210 BCR ABL1转录本的外部质量评价如何?
2019-01-26 MedSci MedSci原创
外部质量评价(EQA)是通过RT qPCR检测p210 BCR ABL1转录本分析检测过程中的重要工具。作为EQA提供商,国家临床实验室中心首次在国内组织了p210 BCR ABL1检测EQA方案,以识别存在的问题,确保p210 BCR ABL1检测的可靠性。 利用armoredRNA技术,首先构建pACYC MS2 p210和CG重组质粒,表达p210和CGarmored RNA,包装p2
外部质量评价(EQA)是通过RT qPCR检测p210 BCR ABL1转录本分析检测过程中的重要工具。作为EQA提供商,国家临床实验室中心首次在国内组织了p210 BCR ABL1检测EQA方案,以识别存在的问题,确保p210 BCR ABL1检测的可靠性。
利用armoredRNA技术,首先构建pACYC MS2 p210和CG重组质粒,表达p210和CGarmored RNA,包装p210 BCR ABL1融合基因(FG)片段和4个常见的控制基因(CG)转录本。利用这些armoredrna,研究人员制备了冻干p210质量控制(QC)样品板,并评估了中国参与实验室的检测性能。
结果显示,66个参与实验的实验室中,原始p210 BCR ABL1结果变异系数(CV%)基本在60.0% ~ 100.0%之间,差异较大。24国际规模(是)实验室CV %的结果从82.4%下降到61.6%,和实验室的比例在2、3和5折的中间值增加78.2%、87.0%、92.1%、80.1%、89.4%和97.2%,分别与实验室转换后具体的转换因子(CF);然而,由于RT qPCR程序的组分发生了变化,在实验室中也观察到转换结果不佳。在EQA中也发现假阴性和假阳性结果。
研究部门,EQA检测p210 BCR ABL1存在诸多问题。通过解决存在的问题,可以提高p210 BCR ABL1检测的性能以保证我国实验室诊断能力。
原始出处:
Yu Fu Rui Zhang Qisheng Wu Jiawei Zhang, External
quality assessment of p210 BCR‐ABL1 transcript quantification by RT‐qPCR: Findings and
recommendations
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