JCI：完全IRF8缺乏症儿童易患肺泡蛋白沉积症和多种感染性疾病

背景：干扰素调节因子8(IRF8)是一种转录因子，不仅控制哺乳动物髓系造血细胞的发育和功能，而且还控制它们的功能，包括它们对干扰素-γ(干扰素-γ)的反应。常染色体隐性遗传(AR)完全性IRF8缺乏症是一种严重的先天性免疫缺陷(IEI)，已报道有三例无关患者，分别来自爱尔兰、英国和中国。这三名患者出现多种感染，包括口腔念珠菌病，鼻病毒、流感病毒或支原体引起的呼吸道感染，以及卡介苗活疫苗和麻疹、腮腺炎和风疹(MMR)疫苗的不良反应。其中两名患者接受了脑成像，发现脑内钙化。所有三名患者的髓系室都严重受损，外周血白细胞增多是由于大量中性粒细胞增多(高达50-100G/L)，缺乏包括单核细胞和树突状细胞(DC)在内的外周血单核髓系细胞。其中一名患者死亡，而另外两例成功地接受了造血干细胞移植(HSCT)，一例在9个月大时，另一例在4岁。已经描述了导致AR完全IRF8缺陷的四个不同的变体：三个错义变体(p.R83C，p.K108E和p.R291Q)被实验证明是过度表达系统中的功能丧失(LOF)，以及一个截断变体(p.R111*)，没有进行功能测试。另一位NK细胞异常的患者已经被描述，并被发现是两个错义变体(p.A201V和p.P224L)的复合杂合子，但在过度表达系统中是中性的。因此，到目前为止，只有3名无关患者报告了AR完全IRF8缺乏症。我们在此描述第四例AR完全性IRF8缺乏症患者。该患者表现为肺泡蛋白沉积症(PAP)，与其他患者不同。

方法：对1例患有多种感染性疾病和严重肺泡蛋白沉着症(PAP)的阿根廷儿童进行研究。我们进行了全外显子组测序(WES)，并通过遗传学、免疫学和临床手段描述了他的病情。

结果：患者出生和生活在阿根廷。他有病毒性肺部疾病、卡介苗(BCG)引起的播散性疾病、PAP和脑钙化的病史。他在10个月大时死于难治性PAP。WES在IRF8中发现了两个复合杂合体：c.55del和p.R111*。在过表达系统中，p.R111*cDNAs缺失表达，而c.55del cDNAs产生的蛋白质相对分子质量略低于野生型。C.55del下游蛋氨酸残基的突变揭示了翻译的重新启动。然而，在荧光素酶检测中，这两个变异体都失去了功能，表明患者有AR完全的IRF8缺陷。患者没有与中性粒细胞相关的单核细胞或树突状细胞，NK和其他淋巴细胞亚群计数正常。

图1 IRF8变异体在过表达系统中的表达和功能。用未转染(NT)或空质粒(EV)、野生型(WT)或IRF8变异体(患者的变异体)转染的HEK293T细胞的总蛋白提取物进行的Western blotting显示为红色；用丙氨酸(A)取代蛋氨酸(M)残基显示为绿色，而在先前报道的IRF8缺陷患者中发现的变异体显示为棕色。用针对IRF8 N端的单抗或针对C-ter V5标签的抗体检测IRF8。用抗GAPDH的抗体作为载药对照。数据代表n=2个独立实验。B共聚焦显微镜观察瞬时转染EV、WT或突变体IRF8的HeLa细胞，用DAPI和针对IRF8 N端的抗体进行染色。标尺代表20微米/立方米双荧光素酶ISRE3报告活性的HEK293T细胞转EV或不同的IRF8cDNA。条形表示三元组的平均值和标准差(SD)。这些结果代表了两个独立的实验

图2 外周血白细胞、血红蛋白和血小板的计数和功能。监测患者白细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、血红蛋白和血小板水平。B流式细胞术检测单核细胞、mDC、cDc1和pDC。监测患者外周血中CD4+和CD8+T细胞、B细胞和NK细胞的水平(黑线)。自然杀伤细胞CD16+、CD56+表达的Dot图。E细胞因子的诱生，测量两个对照组和患者在脂多糖+干扰素-γ刺激后的上清液中细胞因子的产生。结果以与非刺激细胞的比率表示。

表1 患者外周血中不同免疫细胞亚群的免疫表型

结论：我们描述了4例AR完全性IRF8缺乏症患者。儿童PAP应考虑这种诊断，这可能是由于肺泡巨噬细胞发育或功能缺陷所致。

原文出处：Jérémie Rosain, Andrea Bernasconi, Emma Prieto, et al.Pulmonary Alveolar Proteinosis and Multiple Infectious Diseases in a Child with Autosomal Recessive Complete IRF8 Deficiency.Journal of Clinical Immunology March 2022.