J Periodontal Res：R-spondin 2通过Wnt/β-连环蛋白信号通路促进未成熟人牙周膜细胞的成骨细胞分化
2018-10-05 MedSci MedSci原创
R-spondin（RSPO）家族蛋白是分泌的糖蛋白，其通过激活Wnt /β-连环蛋白信号传导通路在胚胎发育和组织稳态中起重要作用。据报道，RSPO2是RSPO家族的一员，可增强小鼠的成骨能力。然而，关于RSPO2在PDL组织中的作用知之甚少。在这项研究中，我们测量了R-spondin 2（RSPO2）在牙周韧带（PDL）组织和细胞中的表达。此外，我们检查了RSPO2对未成熟人PDL细胞（HPDL
R-spondin（RSPO）家族蛋白是分泌的糖蛋白，其通过激活Wnt /β-连环蛋白信号传导通路在胚胎发育和组织稳态中起重要作用。据报道，RSPO2是RSPO家族的一员，可增强小鼠的成骨能力。然而，关于RSPO2在PDL组织中的作用知之甚少。在这项研究中，我们测量了R-spondin 2（RSPO2）在牙周韧带（PDL）组织和细胞中的表达。此外，我们检查了RSPO2对未成熟人PDL细胞（HPDLCs）的成骨细胞分化的影响。
通过免疫组织化学和免疫荧光染色以及半定量RT-PCR检查RSPO2在大鼠PDL组织和原代HPDLC中的表达。通过定量RT-PCR评估拉伸负荷对RSPO2和Dickkopf相关蛋白1（DKK1）表达的影响。通过半定量RT-PCR评估未成熟的人PDL细胞（细胞系2-14或2-14细胞）中RSPOs受体的表达，例如富含亮氨酸的重复序列的G蛋白偶联受体（LGRs）4,5和6。通过茜素红S和von Kossa染色检查在成骨细胞诱导条件下RSPO2处理的2-14个细胞中的矿化结节形成。通过免疫荧光染色和Western印迹分析评估RSPO2处理的2-14个细胞中β-连环蛋白的核转位和活性β-连环蛋白的表达。此外，还检查了Dickkopf相关蛋白1（DKK1）（Wnt/β-连环蛋白信号传导的抑制剂）的作用。
结果显示，大鼠PDL组织和HPDLC表达RSPO2和HPDLC，也表达RSPO2，而在2-14细胞中发现很少。通过暴露于拉伸负荷，RSPO2以及DKK1在HPDLC中的表达显著上调。LGR4主要在2-14个细胞中表达，其表达低水平的LGR5和LGR6。RSPO2增强了2-14细胞中的茜素红S和von Kossa阳性反应。此外，DKK1抑制β-catenin的核转位，β-catenin的活化，以及2-14细胞中茜素红S和von Kossa阳性反应的增加，所有这些都是由RSPO2处理诱导的。
综上所述，该研究结果表明，在PDL组织和细胞中表达的RSPO2可能通过Wnt/β-连环蛋白信号传导通路在调节未成熟人PDL细胞的成骨细胞分化中起重要作用。
原始出处：
Arima M, Hasegawa D, et al., R-spondin 2 promotes osteoblastic differentiation of immature human periodontal ligament cells through the Wnt/β-catenin signaling pathway. J Periodontal Res. 2018 Oct 4. doi: 10.1111/jre.12611.
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