Eur Rev Med Pharmacol Sci：长链非编码RNA H19通过Wnt /β-catenin信号通路促进大鼠外胚间充质干细胞的成骨分化
2018-12-29 MedSci MedSci原创
本研究旨在探究长非编码RNA（lncRNA）H19促进大鼠外胚间充质干细胞（EMSCs）的成骨分化的分子机制。通过流式细胞术从大鼠胎儿面部过程中分离EMSC。通过荧光免疫测定检测成骨标志物CD29，CD90，CD44，CD57，巢蛋白和sox10。瞬时干扰H19构建后，即稳定表达H19 的EMSCs细胞系，使用实时聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测β-catenin和Wnt
本研究旨在探究长非编码RNA（lncRNA）H19促进大鼠外胚间充质干细胞（EMSCs）的成骨分化的分子机制。
通过流式细胞术从大鼠胎儿面部过程中分离EMSC。通过荧光免疫测定检测成骨标志物CD29，CD90，CD44，CD57，巢蛋白和sox10。瞬时干扰H19构建后，即稳定表达H19 的EMSCs细胞系，使用实时聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测β-catenin和Wnt通路靶基因，并诱导EMSCs细胞成骨分化。使用Wnt /β-catenin信号通路抑制剂Wnt-C59处理过表达H19的EMSCs，通过RT-PCR和Western blot检测β-catenin和成骨标志物的表达。此外，通过转染miR-22和miR-141模拟物和荧光素酶报告基因测定来探索H19调节Wnt /β-连环蛋白信号传导途径的机制。
结果显示，研究成功分离并鉴定了EMSCs，成骨标志物CD29，CD90，CD44，CD57，巢蛋白和sox10明显过表达。成骨诱导的溶液明显增加EMS19中H19和成骨标志物ALP，Runx2，BMP和OCN的表达（p <0.05）。干扰H19明显抑制Wnt /β-catenin信号通路的成骨标志物，β-连环蛋白和靶基因的表达（p <0.05），而H19的上调则显著促进EMSCs中这些标志物和基因的表达（p <0.05）。Wnt-C59抑制剂治疗在具有H19过表达的EMSC中抑制Wnt /β-连环蛋白信号传导通路和成骨分化（p <0.05）。此外，H19可以阻断miR-22和miR-141对β-catenin的抑制作用，并在转染EMSC中的miR-22模拟物和miR-141模拟物后激活Wnt /β-catenin信号通路（p <0.05）。
综上所述，该研究结果表明，LncRNA H19通过激活Wnt /β-catenin信号促进大鼠EMSCs的成骨分化，为EMSCs在牙体组织工程再生修复中的应用提供理论依据。
原始出处：
Gong YY, Peng MY, et al., Long non-coding RNA H19 promotes the osteogenic differentiation of rat ectomesenchymal stem cells via Wnt/β-catenin signaling pathway. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2018 Dec;22(24):8805-8813. doi: 10.26355/eurrev_201812_16648.
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